肠道病毒71型2C蛋白的异源表达及纯化
摘要：
目的 获得高纯度、性状均一的可溶蛋白肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)2C. 方法 截取2C蛋白的6个包含ATPase/解旋酶等核心结构域的基因片段,分别使用含有His标签和MBP促溶标签的表达载体在大肠埃希菌中进行异源表达,分子筛层析纯化2C蛋白,SDS-PAGE电泳检测表达产物和纯化蛋白. 结果 成功将EV71 2C蛋白的6个片段进行了克隆表达并纯化,获得了高纯度、性状稳定的可溶蛋白MBP-2C 91aa-256aa和MBP-2C 118aa-256aa.SDS-PAGE检测2C蛋白纯度达97％以上,分子质量与预期结果一致.纯化的2C蛋白浓度为8.8 mg/ml. 结论 91aa-256aa和118aa-256aa片段的MBP-2C截短蛋白比包含其他片段的截短蛋白性状稳定、均一,MBP标签提高了2C的6个截短蛋白的可溶性.高纯度可溶蛋白的制备为其晶体结构和功能研究奠定了基础.
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doi：
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关键词：
肠道病毒71型(enterovirus 71
EV71)
2C蛋白
异源表达
纯化方法
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Keyword：
Enterovirus 71(EV71)
2C protein
heterologous expression
purification
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作者：
刘艳
李志会
李鹏
岳盈盈
宋楠楠
秦立增
李冰清
孟红
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Author：
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作者单位：
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刊名：
中国病原生物学杂志
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Journal：
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年，卷(期)：
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所属期刊栏目：
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基金项目
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在线出版日期：
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