子宫内膜异位症患者异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶表达及氧化应激相关分子含量检测的意义

　　子宫内膜异位症患者异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶表达及氧化应激相关分子含量检测的意义

　　郭敏，朱波，黄凌霄，沙丽晓，董晓霞，叶琳温州市人民医院妇产科，浙江温州325000

　　摘要：目的探讨子宫内膜异位症( EMs)患者异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶的表达及氧化应激相关分子含量检测的意义，旨在为临床提供依据。方法选取2016年1月-2017年1月在温州市人民医院诊治的70例EMs患者为研究对象，收集异位及在位子宫内膜组织;另选取同期年龄相符的行输卵管绝育手术的健康女性子宫内膜组织50例为对照组。将70例EMs患者根据疼痛视觉模拟( VAS)评分分为轻度疼痛(24例)、中度疼痛(30例)、重度疼痛(16例)。采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测子宫内膜组织基质金属蛋白酶2、3、7(MMP2、3、7)水平以及氧化应激产物8-异前列腺素F2a(8- iso -PGF2a)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、高级氧化蛋白产物(AOPP)水平，并进行相关性分析。结果 异位子宫内膜组织MMP2、3、7水平显著高于在位组织与正常组织，在位组织MMP3水平显著高于正常组织(P<0.05)，MMP2、MMP7差异无统计学意义(P>0.05);异位组织8-iso-PGF2a、8-OHdG、AOPP水平显著高于在位组织与正常组织(P<0.05);在位组织与正常组织差异无统计学意义(JP>0.05);轻度疼痛、中度疼痛、重度疼痛患者血清金属蛋白酶及氧化应激产物水平逐渐升高，不同疼痛程度MMP2、MMP3、MMP7水平、8-iso - PGF2cL、8-OHdG、AOPP水平差异均有统计学意义(P<0.05).，结论 EMs患者异位子宫内膜组织中氧化应激反应更强，金属蛋白酶表达更高，子宫内膜组织异位以及盆腔疼痛可能与氧化应激与蛋白水解有关。

　　关键词：子宫内膜异位症;异位子宫内膜组织;基质金属蛋白酶;氧化应激

　　中国图书分类号：R711. 71文献标识码：A文章编号：1001-4411(2018)16-3766-03;doi:10. 7620/zgfybj.j.issn.100l -4411. 2018.16.54

　　子宫内膜异位症( EMs)是指子宫内膜以外存在活性的内膜细胞种植的情况，是女性常见妇科疾病。内膜细胞正常情况下生长于子宫腔内，但输卵管使盆腔与子宫腔相通，进而使内膜细胞通过输卵管进入盆腔而发生异位生长[11。目前尚未明确EMs的发病机制，但出现了多种学说，广泛认可的一种为子宫内膜种植。EMs是一种良性病变，但子宫内膜组织异位侵袭、种植、增殖能力较强，会造成痛经、月经异常、慢性盆腔痛等，严重者引起不孕，给患者生活质量带来极大的影响心。随着妇产科学的发展，异位的子宫内膜组织存在基质金属蛋白酶异常表达现象，MMPs的高表达可出现氧化应激反应以及细胞外基质成分降解异常，引起局部组织损伤，且可能与子宫内膜异位生长具有十分重要的关系阳1。本研究探讨EMs患者异位子宫内膜组织中基质金属蛋白酶表达及氧化应激相关分子含量的检测意义。

　　1资料与方法

　　1.1 资料来源 选取2016年1月- 2017年1月在温州市人民医院诊治的70例EMs患者为研究对象，收集患者异位及在位子宫内膜组织;另选取同期年龄相符的50例行输卵管绝育手术的健康女性的子宫内膜组织为对照组。将70例EMs患者根据疼痛视觉模拟( VAS)评分分为轻度疼痛(24例)、中疼痛(30例)、重度疼痛(16例)。70例EMs患者年龄21~45岁，平均(30. 45 +3. 43)岁;有生育史40例，无生育史30例。盆腔轻度疼痛24例，重度疼痛30例，对照组为行输卵管绝育手术的健康女性，年龄26~ 46岁，平均(31. 56+3. 34)岁。

　　纳入标准：所有患者均经手术证实为EMs;患者对本研究知情并签署知情同意书;无其他盆腔器质性疾病;年龄≥18周岁。排除标准：合并官颈癌、卵巢癌等恶性肿瘤患者。

　　1.2方法标本采集：EMs患者在术前诊刮时采集适量的在位子宫内膜组织，在行卵巢囊肿剥除术后采集适量异位子宫内膜组织;行输卵管绝育手术者，在确保未合并其他盆腔疾病的基础上于月经期采集适量正常子宫内膜组织。采集组织后进行明确标记，均使用生理盐水清洗，清洗3～5遍后进行液氮速冻，15~30 min后保存于-80℃冰箱待检。检测：取出适量组织，常温下解冻后加入蛋白裂解液进行充分匀浆，对组织悬液进行离心处理，采用4℃离心机，离心20 min，12 000 r/ min，分离上清液。采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测子宫内膜组织基质金属蛋白酶2、3、7( MMP2、3、7)水平以及氧化应激产物8-异前列腺素F2仪(8 -iso -PGF2a)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、高级氧化蛋白产物( AOPP)水平，采用美国R&D公司生产的ELISA快速检测试剂盒检测，使用试剂盒配套反应板、标准物，按说明书详细操作。疼痛程度分组方法：使用VAS评分标准，做一条长度为10 cm的线段，根据自身盆腔疼痛程度做标记，0分为无任何疼痛，10分为难以忍受的疼痛，将疼痛VAS评分0~3分判定为轻度疼痛，4~7分为中度疼痛，7—10分为重度疼痛。

　　1.3 统计学分析 所有检验数据均经双人、双机录人数据库，采用SPSS 19. 00统计软件进行统计学分析，计数资料[例t%)]表示，行x2检验，计量资料以(x+s)表示，多组比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK法检验，P

　　2结果

　　2.1 不同子宫内膜组织中MMPs水平表达情况 异位子宫内膜组织MMP2、MMP3、MMP7水平显著高于在位组织和正常组织(P<0.05)。在位组织MMP3水平显著高于正常组织(P<0.05)。见表1。

　　表1不同子宫内膜组织MMPs水平比较(x+s)

　　注：a.与异位组织比较，P

　　2.2不同子宫内膜组织氧化应激产物水平比较异位组织8 -iso - PGF2a、8-OHdG、AOPP水平显著高于在位组织与正常组织(P<0.05)。见表2。

　　表2不同子宫内膜组织氧化应激产物水平比较(x+s，ng/ml)

　　注：a与异位组织比较，P

　　2.3 不同疼痛程度异位子宫内膜组织MMPs水平比较不同疼痛程度MMP2、MMP3、MMP7水平比较差异均有统计学意义(均P

　　表3不同疼痛程度异位子宫内膜组织MMPs水平(x+s)

　　注：a.与轻度疼痛比较，P

　　2.4 不同疼痛程度异位子宫内膜组织MMPs水平比较轻度疼痛、中度疼痛、重度疼痛患者氧化应激产物逐渐升高，不同疼痛程度8-iso-PGF2a、8-OHdG、AOPP水平比较差异均有统计学意义(均P

　　表4不同疼痛程度异位子宫内膜组织氧化应激产物水平比较(i±一，ng/ml)

　　注：a.与轻度疼痛比较，，<0. 05;I，与中度疼痛比较，P

　　3讨论

　　EMs是常见良性的妇科疾病，育龄期妇女中约有20%的发病率。有关EMs发病机制的研究国内外学者均提出了多种假说，研究。认为，经血逆流学是符合EMs病变特征的一种，更有可能是导致FMs发病的必要条件。有研究。61表明，育龄期妇女经血逆流非常普遍，但EMs发病人数只占其中一小部分，尚无法完全解释EMs的发病机制，表明经血逆流可能只是EMs发病的诱因之一。近年来，随着研究的深入，腺上皮及间质细胞等子宫内膜碎片必须通过黏附、侵袭以及血管形成等才能引起EMS，因此这个过程被认为是EMs发病的关键环节。众多研究证实，在EMs这种与恶性肿瘤相似的侵袭中，MMPs起着重要作用，其家族成员种类较多，能降解层粘连蛋白、纤维粘连蛋白等细胞外基质，导致脱落的子宫内膜侵袭性加强，进而发生种植。MMPs能调节外基质合成与降解，在EMs发病中起重要作用!引。

　　MMPs是一类对钙、锌依耐性很强的蛋白酶分子，MMPs的MMP2、MMP3、MMP7对基底膜以及IV胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白、明胶等细胞外基质均表现为水解作用，细胞外基质、基底膜的水解能导致异位的子宫内膜突破局部基底膜的屏障，进而加速子宫内膜的异位生长过程[IO]。本研究结果显示，异位子宫内膜组织MMP2、MMP3、MMP7水平显著高于在位组织与正常组织(P<0.05)，与金健l111研究结果相一致。表明EMs中在位的子宫内膜组织MMPs水平都接近于正常水平，而脱落组织显著升高，证实MMPs在EMs发病过程中的重要作用。邱俏檬等I2]认为，MMPs异常表达既能加强异位子宫内膜组织的侵袭，还能影响细胞外基质降解过程以及合成过程的平衡，出现细胞外基质堆积于组织间的现象，并造成组织粘连，盆腔内组织过度粘连是引起慢性盆腔痛的主要解剖学基础，与本次研究结果相一致。

　　EMs患者异位子宫内膜组织中活性氧(过氧化氢、超氧阴离子)等以及活性氮(过氧亚硝酸盐阴离子、二氧化氮)生成显著增多[13]，活性氧、活性氮不仅能加快子宫内膜组织异位生长、调节细胞生物学行为，还可导致局部组织发生氧化反应，相应的氧化产物生成量增加，并消耗大量抗氧化酶。本文研究结果显示，异位组织8 -iso - PGF2a、8-OHdG、AOPP水平显著高于在位组织与正常组织(P<0. 05)。表明氧化应激产物越多，氧化应激反应程度越高，子宫内膜细胞生物学行为失常越严重，导致子宫内膜异位，且造成的疼痛程度增加。

　　综上所述，EMs患者异位子宫内膜组织中氧化应激反应更强，金属蛋白酶表达更高，子宫内膜组织异位以及盆腔疼痛可能与氧化应激及蛋白水解有关。

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